1. 第一次做实验时◆◆■◆◆,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。
不仅如此,CCK-8 对细胞的毒性极小,完全可以测完细胞增殖或药物毒性后再继续用细胞进行下游实验。下面就来为大家介绍一下 CCK-8 的具体情况。
A★★■◆■■:CCK 稳定性高,避光条件 -20℃ 有效期 2 年,4℃ 有效期 1 年◆◆★■■◆。经常使用建议 4℃ 保存,避免反复冻融。CCK 正常颜色为粉红色,若颜色发生明显偏差,质量可能有发生变化。
答★★:可以采取 2 个办法:1、适当增加细胞数量■★★◆◆;2、延长加入 CCK-8 试剂后的反应时间。
2. 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来■■◆★,导致每孔中的细胞数量不一致。
3◆◆■. 培养板周围一圈孔培养液容易挥发,为减少误差■★■,建议培养板周围的四边每孔只加培养基★◆■◆★。
答:可以缩短加入 CCK-8 后的培养时间。例如■★◆◆:可以把加入 CCK-8 试剂后的培养时间由 2 小时缩短为 1 小时。此外,可适当减少细胞的数量。
4. 建议采用多通道移液器,减少平行孔间的误差,加 CCK-8 时,建议斜贴着培养板壁加★■★◆★■,不要插到培养基液面下加★◆★■■■,容易产生气泡■■◆,干扰 OD 值。